在运用血液分析仪进行血小板(PLT)计数时,当呈现数量图形反常或报警提示,应运用显微镜或许流式细胞仪对血小板计数做复核。ICSH(世界血液学标准化委员会)引荐
参阅办法是一种可清楚和精确描绘的用于特定检测的技能,该技能要有根据,可供给高度精确和精细的试验数据以点评其他试验办法查验测验成果的有效性。
EDTA抗凝血标本中血小板用血小板特异的荧光抗体进行染色,用流式细胞仪检测红细胞(RBC)和PLT比值,再用RBC计数值除以RBC/PLT比值计算出PLT计数值。
标本中不能有肉眼可见的溶血或小凝块,室温下4小时内完结检测。试验前轻柔地充沛混匀标本,确保RBC和PLT散布的均一性。
PLT约2μm左右,流式细胞仪对FITC符号直径为2μm的球形颗粒时必须有满足的敏感度。
●在标本检测中运用聚丙烯或聚苯乙烯容器,不得运用玻璃容器,防止血小板黏附于容器上。
●运用FITC符号的CD41和CD61抗体,这两种抗体能够与血小板膜糖蛋白GPIIb和IIIa构成复合物,用于检测PLT。需供认抗体能够将PLT从噪声、碎片和RBC平分辨出来。
● 用流式细胞仪检测时,应至少检测5000个信号,其间PLT(下图R1门所示)应多于1000,仪器设定确保每秒少于3000个信号。关于一起收集到RBC散射光和PLT荧光信号(下图R4门所示),应被视为堆叠,计数成果将别离计入RBC和PLT。
①红细胞浓度计数详细参照中华人民共和国卫生行业标准WS/-845-2005年红细胞和白细胞计数参阅办法。
●此办法仅得出PLT和RBC比值,要取得PLT计数正确成果,还应一起确保RBC计数精确性。
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